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柱長影響三個重要參數。它們是柱效、保留(分析時間)和載氣壓力。
柱效(N) 與柱長呈正比。分離度是理論塔板數的平方根函數。比如,雙倍的理論柱長(因此效率也會加倍)只能增加1.41 倍(實際上接近于1.2-1.3 倍)的分離度。如果峰分離度較小并需要高柱效(即窄峰)時,需使用較長的色譜柱。
在恒溫條件下,溶質的保留與柱長呈正比。在程序升溫條件下,溶質的保留是恒溫條件下的1/3-1/2。通過增加柱長來提高柱效時,分析時間也會顯著增加。
柱頭壓與柱長成正比。除非色譜柱的內徑太小或太大,否則壓力一般不是問題。直徑較小,柱長較
長的色譜柱需要非常高的柱頭壓,而直徑較大、柱長較短的色譜柱需要的柱頭壓較低。兩種情況都
不很實際,并且可能成為分析的一種限制因素。載氣的選擇也會影響色譜柱壓力。
色譜柱流失將隨著柱長的增加而增加。較長的色譜柱的固定相較多,故會產生較多的降解產物。隨
著柱長增加流失增加并不太大,必要時不會妨礙較長色譜柱的使用。
色譜柱成本與柱長直接相關。柱長加倍,色譜柱價格幾乎也加倍。通過增加柱長來提高柱效,色譜
柱成本也會顯著增加。考慮到分析時間的延長,增加柱長則應該是增加柱效的zui后考慮的一項合理
選擇。
較短色譜柱的每米成本要高于較長色譜柱。將較長色譜柱切割成較短色譜柱似乎是一個省錢的好辦
法,但我們不建議這樣做。較小的切割段不能保證質量,可能與原來的完整色譜柱不同。理論上
講,每個切割段都應當提供滿意而一致的結果。實際上卻經常不是這樣。從原來的色譜柱切割下來
較短的切割段時,單個切割段變異的可能性更高。隨著柱長、液膜厚度和固定相極性的增加,以及
柱內徑的減小,將發現各個切割段之間的誤差會越來越大。zui后,在其它柱架上重新纏繞較短的色
譜柱時,管線折斷的幾率也會增加。技術上來說,將色譜柱切割成較短的段將無法保障其性能。
色譜柱柱長選擇概述
1. 如果不知道*長度,請先使用25-30 米長的色譜柱。
2. 10-15 米的色譜柱十分適用于分離含有很容易分離的溶質的樣品或含溶質較少的樣品。內徑很小的色譜柱通常采用較短的長度以降低柱頭壓。
3. 如果通過其它方法(較小內徑、不同的固定相、改變柱溫)不能達到滿意的分離度時,應使用50-60 米長的色譜柱。這種色譜柱適合分離含有很多組分的復雜樣品。長的色譜柱的分析時間較長、費用較高。